玉树地区独一味ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者:王京 张晓明 乔枫 金兰 陈志 罗桂花

摘要:为了建立玉树地区独一味的简单重复序列区间聚合酶链式反应(ISSR-PCR)体系并筛选出引物,采用Mg2+、DNATaq酶、dNTP、模板DNA和引物进行5因素4水平正交实验,对独一味ISSR-PCR反应体系进行筛选。结果表明:最佳反应体系(25μL)为:10×PCR Buffer,75ng模板DNA,0.75μmol/L引物,0.5UTaq DNA聚合酶,1.25 mmol/L MgCl2,0.05 mmol/LdNTP。然后确定了引物的最佳退火温度,并筛选出811、818、825、826、834、835、836、840这8条丰富多态稳定扩增的引物。该研究建立的玉树地区独一味ISSR反应体系具有稳定、清晰以及重复性好等特点,可为该区独一味的繁育系统和遗传多样性的进一步研究提供参考。

分类:
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关键词:
  • 独一味
  • 反应体系
  • 正交设计
  • 优化
  • 引物筛选

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期刊名称:北方园艺

期刊级别:北大期刊

期刊人气:17736

杂志介绍:
主管单位:黑龙江省农业科学院
主办单位:黑龙江省农业科学院
出版地方:黑龙江
快捷分类:农业
国际刊号:1001-0009
国内刊号:23-1247/S
邮发代号:14-150
创刊时间:1977
发行周期:半月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
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综合影响因子:1.15