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摘要:细菌L型是细菌等微生物细胞壁缺陷的变异型。细菌L型由于缺壁引起许多酶和毒素发生改变,其致病特点以及在各种感染中的意义已有评述。又由于缺壁程度不同,表现有形态的多形性,菌落也多种多样;生化反应大多减弱或转阴;抗原性也有明显改变,难以识别。由于缺壁,大多L型对渗透压敏感,在常规培养基中不能生长,
摘要:目的:获取变形链球菌国内临床株表面蛋白PAC编码基因pac并构建载体质粒,为构建植物表达基因载体做前期准备。方法:以国内检出率最高的变形链球菌临床分离株(血清c型)的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获取表面蛋白PAc编码基因pac;通过T-A克隆构建中间载体pMD18-pac质粒,对其分析鉴定。结果:目的基因成功的连接到中间载体上。结论:获取的目的基因经测序和比对表明,其与变形链球菌表面蛋白的相关编码基因在核苷酸序列和蛋白同源性上都很高,可以作为抗原基因进一步研究。
摘要:目的:在TOP10大肠埃希菌pTrcHisB系统中表达人4-1BBL(h4-1BBL)融合蛋白,并对其进行鉴定。方法:应用RT-PCR方法,从Raji细胞中克隆h4-1BBL基因中的CDS序列,构建pTrcHisB-h4-1BBL原核表达载体,测序后,经IPTG诱导表达,Westernblot鉴定h4-1BBL融合蛋白的表达情况。结果:成功构建了重组载体pTrcHisB-h4-1BBL,重组蛋白是带6个His标记的h4-1BBL融合蛋白。结论:重组载体pTrcHisB-h4-1BBL成功表达了h4-1BBL融合蛋白,为进一步研究其功能奠定了一定的基础。
摘要:目的:探讨生长抑制基因(inhibitor of growth,p33^ING1)在结直肠癌中的表达意义,以及p33^ING1与结直肠癌临床病理特征的关系及其可能的作用机制。方法:对60例结直肠癌组织及20例癌旁非肿瘤组织标本,应用免疫组化检测肿瘤组织和正常组织的p33^ING1、p21^WAF1的表达。结果:p33^ING1在结直肠癌组织中的表达阳性率为43.3%,在正常组织中为90.0%,显著低于正常组织(P〈0.005);p33^ING1减低与结直肠癌的Dukes分期及淋巴结转移有一定关系(P〈0.005和P〈0.01),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤部位及浸润深度无明显关系(P〉0.05)。p33^ING1与p21^WAF1表达呈正相关关系(P〈0.05)。结论:p33^ING1在结直肠癌组织中低表达,对结直肠癌的发生、发展可能起着重要的作用;p33^ING1、p21^WAF1表达可作为判断结直肠癌恶性程度的重要指标之一。
摘要:目的:探讨胸腔积液(胸水)LUNX mRNA检测对肺癌胸膜转移的诊断价值。方法:用荧光定量RT-PCR法检测肺癌组44例、肺外肿瘤13例、肺部良性疾病46例及肺外良性疾病11例胸水标本LUNX mRNA表达;用放射免疫分析法检测胸水中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1),并进行胸水细胞学检测。结果:肺癌组、肺部良性疾病组胸水LUNX mRNA阳性率及中位拷贝数分别为88.6%、23.58copies/ml和5.26%、0copies/ml;肺外良、恶性疾病组胸水LUNX mRNA阳性率及拷贝数均为0;LUNX mRNA检测的敏感性(88.6%)高于CEA、CA125及CYFRA21-1(40.9%、59.1%、61.3%)(P〈0.05~P〈0.005);LUNX mRNA阳性率为88.6%,高于细胞学检查的阳性率(65.9%)(P〈0.005)。结论:LUNX mRNA是诊断肺癌胸膜转移特异性较高的分子标志物,对临床胸水性质的鉴别诊断能提供较好的参考价值。
摘要:目的:通过构建人白细胞介素18(IL-18)真核表达载体,观察其在HO-8910细胞株的表达情况。方法:应用分子克隆技术将IL-18基因插入pCI真核表达载体,应用脂质体介导法转染人卵巢癌HO-8910细胞株。转染分3组,空白组:人卵巢癌HO-8910细胞株+脂质体;对照组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI;实验组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI-hIL-18。以RT-PCR方法分别检测3组的IL-18表达情况。结果:成功构建pCI-hIL-18真核表达载体并转染HO-8910细胞株,RT-PCR、ELISA显示转染pCI-hIL-18重组质粒组在转染的细胞内获得表达。结论:IL-18基因能够转染到HO-8910细胞株中并获得表达。
摘要:目的:观察脑胶质瘤患者脑组织survivin、caspase-3的表达情况及survivin ASODN对脑胶质瘤U251细胞survivin和caspase-3表达的影响,探讨两者与脑胶质瘤发病及预后的相关性。方法:免疫组化法检测脑胶质瘤患者survivin和caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测脑胶质瘤组织survivin mRNA表达,以脑胶质瘤U251细胞为研究对象,转染不同剂量survivin ASODN(100nmol/L、300nmol/L、500nmol/L),并于培养不同时间(24h、48h、72h)后,RT-PCR检测U251细胞survivin和caspase-3的表达。结果:脑胶质瘤患者脑组织survivin蛋白高表达(阳性率69.6%),而caspase-3低表达(阳性率50.7%),且两者表达的阳性率与肿瘤的恶性程度有关。U251细胞在不同浓度survivin ASODN转染不同时间后,以500nmol/L survivin ASODN转染72h对U251 survivin mRNA的抑制率达62.06%,与对照组及不同浓度组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05-P〈0.01)。免疫组化结果显示转染后survivin表达下调,而caspase-3表达上调。结论:脑胶质瘤患者脑组织高表达survivin蛋白,而低表达caspase-3蛋白,survivin ASODN可诱导U251细胞株survivin mRNA及蛋白表达下调,而caspase-3蛋白表达水平上调。
摘要:目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA在HBsAg、HBeAg阳性患者睾丸和附睾组织中的检出及细胞学定位。方法:选取22例HBsAg、HBeAg阳性患者的睾丸和附睾组织,以18例HBsAg、HBeAg阴性者睾丸和附睾组织作为对照,应用巢式聚合酶链反应(nest-PCR)技术和荧光原位杂交(FISH)技术检测并定位睾丸和附睾组织中的HBV DNA。结果:22例乙肝患者睾丸和附睾组织中,18例组织检出HBV DNA,阳性率81.8%,对照组未检测到HBV DNA,两组差异有统计学意义(P〈0.001);HBV DNA在睾丸组织中主要集中在生精小管的生精上皮和基底部。结论:乙型肝炎患者睾丸和附睾组织中存在HBV DNA,且定位于各级生精细胞内,为HBV的垂直传播提供了形态学依据。
摘要:目的:探讨直肠癌术后髂内动脉置泵区域性化疗的并发症发生原因及相应的预防措施。方法:回顾分析直肠癌患者行根治术的同时加行髂内动脉置泵(单侧)化疗发生并发症患者的临床资料。结果:7例发生并发症,其中置泵侧下肢出现不同程度的疼痛和麻木2例,化疗药渗入皮下致皮下组织部分坏死1例,因化疗泵栓塞灌注失败2例,异物反应重第6次灌注后取出1例,灌注后出现畏寒、发热1例。结论:区域性化疗的并发症主要与置管位置有关,但不能排除与化疗药浓度、量、间隔时间、注药速度及个体差异有关,另外还与无菌操作不严格、肝素钠的浓度及术者经验等均有很大关系。
摘要:目的:探讨Creutzfeldt-Jakob病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)临床早期诊断方法。方法:对2例CJD病患者的临床表现、影像学特点、脑电图改变等资料进行回顾性分析和总结。结果:2例均符合国人CJD临床特点。弥散加权成像(DWI)能检测出特征性病灶,较目前WHO的CJD诊断方法更具敏感性。结论:提高临床医师对本病临床特征性的认识,可以尽早作出正确诊断,减少医源性传播;作为无创性检查的DWI在CJD诊断方法中最具敏感性,临床诊断标准中应考虑DWI检查的列入。
摘要:目的:提高原发性十二指肠肿瘤的诊断及治疗水平。方法:总结1999-2006年经病理证实16例原发性十二指肠肿瘤,分析其病理特征与临床表现、诊断及治疗的关系。结果:行胰十二指肠切除术8例,1例术后7个月死亡;1例术后2个月痊愈,出院后失去随访;生存3年者4例,5年者2例。肠段切除(球部、水平部肿瘤)2例,1例存活3年,1例存活2年后失访。姑息性手术者6例于术后3-11个月死亡;2例仅行探查活检,均于术后6个月内死亡。结论:早期诊断的关键是提高对本病的认识,对可疑患者,应作相应特殊检查,确诊后及时手术,方可提高疗效。
摘要:目的:比较氟比洛芬酯与奈福泮用于自控静脉镇痛(patient-controlled intravenous analgesia,PCIA)的临床效果。方法:择期全麻手术90例(腹部和开胸手术),随机分成3组,每组30例。A组:氟比洛芬100mg+芬太尼0.35mg;B组:氟比洛芬100mg;C组:盐酸奈福泮100mg+芬太尼0.35mg。3组均用0.9%NaCl稀释至100ml。A组和B组在全麻插管后即静脉注射(静注)氟比洛芬酯50mg,C组在手术结束前10min静注盐酸奈福泮20mg。参数设定:持续输注量为2ml/h,PCIA为2ml,锁定时间10min。所有患者术毕静注恩丹西酮4mg。观察术后2h、4h、8h、16h、24h、36h的视觉模拟镇痛评分(VAS)和相关的不良反应,记录36h内PCIA按压次数,调查PCIA的基本满意度。结果:所有患者均即时清醒拔管。A组在各时段VAS和按压总次数均显著低于B、C组(P〈0.01),B组与C组差异无统计学意义(P〉0.05)。不良反应中咽喉痛和精神症状C组显著高于A组和B组(P〈0.01),而A组与B组差异无统计学意义(P〉0.05);A组满意度显著高于B组和C组。结论:氟比洛芬与盐酸奈福泮均可行PCIA;在复合同等小剂量芬太尼时,氟比洛芬效果更加满意,不良反应发生率少,值得临床推广。
摘要:目的:探讨超声引导下平阳霉素局部注射治疗特殊部位血管瘤、血管畸形的疗效。方法:对15例特殊部位血管瘤或血管畸形患者在超声引导下用平阳霉素局部注射治疗,每次剂量不超过8mg;多次注射者,间隔3周,总剂量不超过70mg。结果:治愈10例,好转4例,无效1例;无局部破溃坏死、无误穿等情况发生。结论:超声引导下平阳霉素局部注射治疗特殊部位血管瘤、血管畸形,操作简便,安全可靠,可有效减少或避免并发症的发生,提高治疗效果。
摘要:目的:探讨单侧唇裂术后继发鼻畸形的矫正方法。方法:对68例移位的组织进行完全游离及复位,通过埋没导引针将患侧鼻翼软骨悬吊于健侧的侧鼻软骨,鼻翼外侧脚内收,矫正鼻中隔偏曲,用鼻中隔软骨或耳甲软骨行患侧鼻翼软骨支架的重建,实现鼻畸形的综合矫正。结果:68例均一期愈合,68例中54例随访3-12个月,优38例,良16例。结论:埋没导引法联合鼻中隔软骨切除自体软骨移植可有效地矫正鼻中隔偏曲和鼻部下端畸形,移位组织的完全游离及复位是单侧唇裂术后继发鼻畸形修复的基础。
摘要:目的:探讨肺炎性假瘤(pulmonary inflamnatory pseudotumor,PIP)的诊断和治疗,以期降低误诊率,提高疗效。方法:43例PIP全部手术治疗,肺叶切除术29例,楔形切除11例,全肺切除3例,并经病理证实。结果:术前37例误诊,误诊率86%。误诊为肺癌18例,肺占位性病变13例,肺结核5例,其他1例。术后脓胸1例,无其他并发症,无死亡病例,均痊愈出院。结论:PIP属良性病变,其临床表现和影像学检查缺乏特征性变化,术前误诊率高。手术方式以局限性肺切除或肺叶切除为主。术前肿块穿刺活检和术中冷冻病理切片是诊断和决定术式的主要依据。
摘要:目的:探讨老年人高血压左心室肥厚(LVH)与血压变异性(BPV)及Q-T间期离散度(QTcd)之间的关系。方法:选择69例门诊及住院的老年高血压患者(≥60岁),进行超声心动图检查、24h动态血压监测、静息同步12导联心电图检查,测左室重量指数、QTcd及BPV等相关参数。结果:LVH组平均左室重量指数为(158.68±23.57)g/m^2,明显高于左心室正常组(P〈0.001);LVH组24h收缩压变异系数、白天、夜间收缩压变异系数、校正QTcd均明显高于LVH组(P〈0.01-P〈0.001)。结论:老年患者高血压LVH与BPV有关,LVH是心律失常、猝死的独立危险因素,BPV可作为降压治疗的新目标。
摘要:目的:探讨心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死(AMI)超早期诊断中的准确度及其应用价值。方法:75例发病12h内入院的AMI患者作为研究组,其中发病在4h内29例,4-12h46例;25例冠脉造影正常者入选对照组。采用双抗体夹心ELISA法定量测定待测血清H-FABP和肌钙蛋白(cTnI)值,并分别绘制两指标在AMI发病4h内、4-12h两组的特征曲线(ROC),比较曲线下面积(AUC)。并按推荐CUTOFF值计算敏感性、特异性、约登指数(Youden index)、阴性预测值(NPV)、阳性预测值(PPV)。结果:4h内H-FABP和cTnI比较,AUC、敏感性、约登指数、NPV差异有统计学意义(P〈0.01);4-12h内H-FABP和cTnI比较,AUC、敏感性、约登指数、NPV差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论:H-FABP在AMI早期准确度高,在发病4-12h内,与cTnI一样是优秀的AMI诊断指标;而在4h以内诊断准确度及预测价值明显高于cTnI,非常有利于AMI尽早诊断与排除。